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二抗

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免疫组化试剂盒(抗小鼠二抗)

货号:G1216

品牌:Servicebio

价格:¥400

规格: 200T

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产品简介:

  该试剂盒是一个特别敏感的两步法免疫组化试剂盒,适用于一抗来源为小鼠的抗体。其中二抗为辣根过氧化物酶与山羊抗小鼠IgG结合而成的分子,该分子与小鼠来源一抗(先与抗原反应)结合,结合后的大分子即标记有辣根过氧化物酶,再与DAB反应,得到棕黄色沉淀。由于该系统不含生物素和链霉亲和素,所以不受内源性生物素干扰,染色背景非常清晰。

包装内容:

产品货号 产品名称 规格
G1216-1 DAB稀释液 12.5 mL
G1216-2 50×DAB原液 250 μL
G1216-3 HRP标记山羊抗小鼠二抗 100 μL

保存条件:

  整套试剂盒-20℃保存。二抗-20℃保存;DAB稀释液和50×DAB原液4℃保存;有效期12个月。

使用方法:

  1.常规切片脱蜡至水。

  2.于修复液中修复。一般为Tris-EDTA或柠檬酸修复液。

  3.加过氧化物酶阻断剂(常用3%过氧化氢)于组织上避光孵育15分?#21360;?#33976;馏水冲洗。

  4.PBS冲洗三次,每次5分?#21360;?/p>

  5.浓度为3%的BSA(pH7.2-7.4的PBS缓冲?#21495;?#21046;)或正常山羊血清工作液于组织上孵育30分钟,封闭非特异性结合位点。

  6.甩净封闭液,每张切片加入50-100 μL一抗工作液,4℃过夜。

  7.PBS冲洗三次,每次5分?#21360;?/p>

  8.每张切片加入50-100 uL二抗工作液(二抗原液G1216-3用pH7.2-7.4的PBST以1:200的比例稀释),室温下孵育30-60分?#21360;?/p>

  9.PBS冲洗三次,每次5分?#21360;?/p>

  10.DAB工作?#21495;?#21046;?#22909;? mLDAB稀释液(G1216-1)中加入20μL 50×DAB原液(G1216-2),混匀备用。?#37096;?#26681;据试验结果再适当稀释后使用。

  11.每张切片加50-100 μL新鲜配制的DAB工作液,室温下孵育。显微镜控制具体显色时间。

  12.显色完全后,蒸馏水或自来水冲洗。苏木素复染,0.1%盐酸分化,自来水冲洗返蓝。

  13.切片经过梯?#26579;?#31934;(70-100%)脱水,二甲苯?#35813;鰨?#20013;性树胶封片。

注意事项:

  1.如果为冰冻切片或细胞爬片,请将标本固定后自第3步开始。

  2.以上步骤仅供参?#36857;?#35831;根据?#23548;是?#20917;调整。

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