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RIPA裂解液(弱)

货号:G2033-100

品牌:Servicebio

价格:¥120

规格: 100ml

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产品简介:

  RIPA裂解液 (RIPA Lysis Buffer) 是一种传统的细胞、组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解后的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。RIPA裂解液有很多配方,按效果来?#31181;?#35201;分为强,中,弱三种。本裂解液为RIPA弱裂解液,其主要成分为50 mM Tris-Hcl,150 mM NaCl,1 mM EDTA-Na2, 1% NP-40,0.25% Sodium deoxycholate。

包装内容:

产品货号 产品名称 规格
G2033 RIPA裂解液(弱) 30 mL/100 mL

保存条件: 4℃保存,有效期12个月。

操作?#24471;鰨?/strong>

  对于组织样品:

  1.组织块用冷PBS洗涤,去除血污。剪成小块置于匀浆器中。

  2.加入10倍组织体积本试剂(使用前数?#31181;?#20869;加入蛋白酶?#31181;?#21058;)冰上彻底匀浆。

  3.将匀浆液转移至1.5 mL离心管中,振荡。冰浴30 min,期间用移液器反复?#33633;潁?#30830;保细胞完全裂解。

  4.12000g离心5 min,收集上清,即为总蛋白溶液。

  对于培养细胞样品:

  1.对于贴壁细胞:

  a.用PBS冲洗细胞2-3次。最后一次彻底吸干残留液。

  b.加入?#23454;?#20307;积本试剂(使用前数分内加入蛋白酶?#31181;?#21058;)于培养板、瓶内3-5 min。期间反复晃动培养板、瓶,使试剂与细胞充分接触。

  c.用细胞刮刀将细胞及试剂刮下,收集到1.5mL离心管中。

  2.对于悬浮细胞:

  离心收集细胞,每6?#35013;?#32454;胞加约250 uL本试剂(在使用前数?#31181;?#20869;加入蛋白酶?#31181;?#21058;),振荡。

  冰浴30 min,期间每10 min用200uL移液器反复?#33633;?#25968;次,确保细胞完全裂解。

  3.12000g离心5min,收集上清,即为总蛋白。

注意事项:

  对于组织样品:

  每50mg组织?#25216;?#20837;1mL的本试剂裂解。对于软骨、皮肤等组织,可?#23454;?#20943;少试剂用量,以提高蛋白浓?#21462;?/p>

  对于培养细胞样品:

  1.正常细胞密度下,每个6?#35013;?#32454;胞加入250uL左右裂解液。其它类推。

  2.裂解时可能会出现较粘稠状。可用移液器反复?#33633;潁?#30452;至呈液状为止。如果一直较稠,可用涡旋仪振荡或再加入适量裂解液。

  3.此试剂对人体有害,请?#23454;?#38450;护。

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