产品简介:
TRAP是酸性磷酸酶(ACP)同功酶6种同工酶(0-5)中的第5型,破骨细胞(OC)含量最为丰富,通常作为鉴别OC的重要标志。TRAP染色结果显示OC胞浆阳性,?#31034;?#32418;色,核呈阴性。
包装内容:
产品货号 | 产品名称 | 规格 |
G1050-1 | TRAP染液A醋酸缓冲液 | 18ml |
G1050-2 | TRAP染液B六偶氮副品红溶液 | 500μl |
G1050-3 | TRAP染液C亚硝酸钠溶液 | 500μl |
G1050-4 | TRAP染液D萘酚AS-BI磷酸酯 | 20mg |
G1050-5 | TRAP染液E N,N-二甲基甲酰胺 | 1ml |
G1050-6 | TRAP染液F酒石酸钾钠 | 0.282g |
保存条件:
整?#36164;?#21058;4℃避光保存,有效期12个月。
工作液的配制:
1.将TRAP染液B与TRAP染液C等比例混合,现配现用。
2.将TRAP染液D 20mg用TRAP染液E 1ml溶解,备用。
3.孵育液配制:TRAP染液A 18m加入以上两种溶液各1ml混匀,再加TRAP染液F,充分溶解过滤后备用即为TRAP孵育液。
使用方法:
1.石蜡切片脱蜡至水,纯水洗数?#31181;印?/p>
2.孵育液37℃恒温箱孵育50~90min。
3.自来水冲洗2~5min。
4.苏木素复染核1~2min,盐酸酒精分化,氨水返蓝。
5.常规脱水,透明,中性树胶封片。
细胞爬片染色步骤:
1.细胞固定:吸除孔板里培养液,用蒸馏水洗2遍,吸除蒸馏水,将固定液加入孔板中固定15-30min,蒸馏水洗3遍。
2.细胞破膜:吸除蒸馏水,将破膜液加入孔板中破膜30min,蒸馏水轻洗3遍;
3.孵育染色:滴加孵育液于孔板中,置于37℃孵育1-2h,蒸馏水洗3遍。
4.苏木素染色:滴加苏木素染液染3-5min,蒸馏水洗,分化液分化,蒸馏水洗,返蓝液返蓝,蒸馏水洗。
5.吸除蒸馏水,滴加无水乙醇稍脱水,取出孔板中的盖玻片,吹风机吹干,中性树胶封片。
染色结果:
酸性磷酸酶活性处?#31034;?#32418;色,胞核呈蓝色。
注意事项:
1.本产品适用于EDTA脱钙后的骨组织。酸性脱钙液对骨组织中酶活性破坏?#27927;螅?#19981;适合使用本染液染。
2.切片经孵育液孵育前一定要用纯水洗。
图例:
图一:骨组织EDTA脱钙后染TRAP,破骨细胞红色。
?#32423;?#29273;周骨EDTA脱钙后染TRAP,破骨细胞红色。